叶绿素提取和分离试验
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/03/29 03:02:24
叶绿素提取和分离试验
叶绿素提取和分离试验
叶绿素提取和分离试验
提取:
(1) 取菠菜或其他植物新鲜叶片4-5片(2g左右),洗净,擦干,去掉中脉剪碎,放入研.
(2) 研钵中加入少量石英砂及碳酸钙粉,加2-3ml 95%乙醇,研磨至糊状,再加10-15ml 95%乙醇,离心35min,提取上清液过滤于三角瓶中,残渣用10ml 95%乙醇冲洗,一同过滤于三角瓶中.
(3) 如无新鲜叶片,也可用事先制好的叶干粉提取.取新鲜叶片(以菠菜叶最好),先用105℃杀青,再在80℃下烘干,研成粉末,密闭储存.用时称叶粉2g放入小烧杯中,加95%乙醇20-30ml 浸提,并随时搅动.待乙醇呈深绿色时,滤出浸提液备用.
分离:
(1) 取圆形定性滤纸一张(直径11cm),将其剪成滤纸条(9cm×3cm),用滴管吸取乙醇叶绿体色素提取液,沿纸条的长度方向涂在纸条的一边(距边约1cm),使色素扩散的宽度限制在0.5cm以内,风干后,再重复操作数次.
(2) 在层析缸中加入适量的推动剂,将滤纸条带有色素的一端插入层析缸中,使滤纸条下端浸入推动剂中.迅速盖好层析缸盖.此时,推动剂借毛细管引力顺滤纸条向上扩散,并把叶绿体色素向上推动,不久即可看到各种色素的条带.
(3) 当推动剂前沿接近滤纸边缘时,取出滤纸,风干,即可看到分离的各种色素:叶绿素a为蓝绿色,叶绿素b为黄绿色,叶黄素为鲜黄色,胡萝卜素为橙黄色.用铅笔标出各种色素的位置和名称.
可以简单理解为:溶解度越是大的话溶质和溶剂之间的作用力就越大,相应的滤纸条上由上到下依次为胡萝卜素、叶黄素、叶绿素a、叶绿素b该实验的原理是
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在叶绿素的提取和分离试验中,收集到的滤液绿色过浅,其原因不可能是()A 分数次加入少量的无水乙醇提取B 使用放置数天的菠菜叶C 一次加入大量无水乙醇提取D 未加石英砂,研磨不充分选C