菌落PCR阳性,目的片段2300bp,假阴性可能性很小,但是我取菌涂板子后,竟然没长出来,这是不是说明质粒跑到菌液去了?取菌扩大培养又可以明显看到菌扩增了?

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/08 17:43:04
菌落PCR阳性,目的片段2300bp,假阴性可能性很小,但是我取菌涂板子后,竟然没长出来,这是不是说明质粒跑到菌液去了?取菌扩大培养又可以明显看到菌扩增了?

菌落PCR阳性,目的片段2300bp,假阴性可能性很小,但是我取菌涂板子后,竟然没长出来,这是不是说明质粒跑到菌液去了?取菌扩大培养又可以明显看到菌扩增了?
菌落PCR阳性,目的片段2300bp,假阴性可能性很小,但是我取菌涂板子后,竟然没长出来,
这是不是说明质粒跑到菌液去了?取菌扩大培养又可以明显看到菌扩增了?

菌落PCR阳性,目的片段2300bp,假阴性可能性很小,但是我取菌涂板子后,竟然没长出来,这是不是说明质粒跑到菌液去了?取菌扩大培养又可以明显看到菌扩增了?
有抗性吗?菌扩增,应该是重组质粒有转化进去的.
菌液PCR建议:
上游引物:选择载体上的一段序列
下游引物:选择目的基因的反向引物
这种假阳性可能性很小

菌落PCR阳性,目的片段2300bp,假阴性可能性很小,但是我取菌涂板子后,竟然没长出来,这是不是说明质粒跑到菌液去了?取菌扩大培养又可以明显看到菌扩增了? 什么是菌落pcr假阳性 菌落PCR怎么做有人用菌落做过PCR吗,假阳性高吗,效果怎么样啊 革兰氏阳性菌PCR革兰氏阳性菌如何做菌落PCR?煮20 min后,还是不能P出目的条带. 菌落pcr假阳性如图,菌落pcr,2-6道扩增0.9kb目的条带,7-12扩增1.0kb目的条带.7,8道扩增的1.0kb有点偏离,9道为非特异性扩增,12道在1.0kb位置有隐约条带,是否为非特异性扩增?mark跑直线,而条带两端上扬 菌株菌粉可以直接做菌落PCR么?购买的标准菌株粉末可以直接至于50ulTE溶液,95度热处理5分钟,作为PCR模板么?为什么我扩增不出来目的片段呢?是因为革兰氏阳性菌的细胞壁太厚么?如果是我应该 大肠杆菌转化后做菌落pcr一直p不出带是怎么回事?麻烦高手指教下pcr体系及反应时的程序,目的基因大概1000bp 分子克隆的时候,提出的质粒用菌落PCR是阳性的,但是酶切鉴定的时候却没有切出来目的条带,是怎么回事呢? 革兰氏阳性菌菌落PCR问题我最近也在做菌落PCR验证,我是直接挑单菌落进行PCR验证的,但是电泳不出现条带,胶孔里有明亮物质,100bp处有很多模糊的亮色物,我是一个新手,还望您指教一下,我这种 以革兰氏阳性菌基因组为模板,目的片段500bp左右,体系为,模板1μL,dNTP 2μL,引物1μL,Taq 0.2μL退火温度是50°C,但是PCR后没有目的条带,只要二聚体,引物已经设计两次了,请问可能是什么问题? 菌落pcr假阳性最后一道在1kb处隐约可见条带,是假阳性吗?mark呈直线,而各个条带两端上扬,是什么原因 基因的PCR扩增与人工合成问题?如果目的片段比较短,小于50个bp,是采用PCR扩增还是人工合成呢? 反转录cDNA第一链,进行PCR扩增,只有引物二聚体,这是为什么呢?Oligo(dT)反转录,目的片段2700bp,引物二聚体小于100bp PCR 我P的是两个基因 前两个样品的目的片段是612bp 后两个是672bp 请问P出来了吗? PCR产物为什么会出现100~200bp的条带我用菌落PCR检测library质粒扩增质量,引物用的是takara的M13正反引物,目的质粒基因长度为~500bp.PCR完后电泳图谱显示~750bp有较明显条带,很奇怪的就是100~200bp有 PCR杂带太亮怎么回收目的片段 PCR产物TA克隆,PGEM-T 载体+目的片段,那么转化挑克隆提取的质粒片段是多大?PCR产物TA克隆,PGEM-T 载体的序列是大约3000bp,PCR产物的目的片段是450bp,那么:经过连接、转化后挑单克隆,提取质粒,提 小片段DNA(100-200bp)的PCR扩增PCR模板是100bp-200bp的片段,用SSR引物扩增的时候,出现的不是单一的目的带,目的带出现的同时还有许多非特异性扩增条带,有时候就是条带扩不出来,对于小片段模板