基因表达载体构建的原理和操作步骤转入基因的农杆菌算是基因表达载体吗?

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/04/28 21:51:03
基因表达载体构建的原理和操作步骤转入基因的农杆菌算是基因表达载体吗?

基因表达载体构建的原理和操作步骤转入基因的农杆菌算是基因表达载体吗?
基因表达载体构建的原理和操作步骤
转入基因的农杆菌算是基因表达载体吗?

基因表达载体构建的原理和操作步骤转入基因的农杆菌算是基因表达载体吗?
先回答你的问题,转入外源基因的农杆菌不能较载体,它本身是外源基因的受体,携带外源基因的质粒或者噬菌体才是载体.
你想问基因表达载体的构建,这个问题太大,而且表达载体多种多样,用处也很多,所以很难一下子概况.我只能大概说一下:
原理:将外源基因片段与载体连接(载体通常选用质粒或者噬菌体或其他病毒),将重组的载体转染受体细胞,使之整合入宿主基因组或者在稳定存在于胞质内,是宿主细胞能够表达载体上的外源基因,从而获得新性状或者新产物.
大概步骤:
1)从基因组或cDNA上克隆得到完整的目的基因(至少包含CDS区),通常在两端加粘性末端或重组位点
2)选择合适的表达载体(真核、原核、噬菌体、某些病毒、标记等)
3)将克隆得到的目的基因与载体连接
4)将重组载体通过某种手段转入受体,即宿主中(化学转染、脂质体、电转、显微操作等)
5)筛选阳性的宿主细胞并扩繁